导读:观察杜仲提取物对雌二醇致肾阳虚小鼠的影响。认识杜仲“甘,温,入肝、肾经”药性的现代科学内涵。方法:采用腹腔注射苯甲酸雌二醇造成小鼠肾阳虚模型。ICR雄性小鼠72只,随机分为对照组,模型组,桂附地黄丸组,杜仲水提取物组、正丁醇提取物组、乙酸乙酯提取物组,共6组,每组12只。对小鼠体征、肛温、抓力、游泳时间、自主活动、血清肌酐(Cr)及尿素(UR)、血液学指标、睾丸和精囊腺指数进行测定。结果:杜仲水提取物能提高肾阳虚小鼠肛温、游泳时间、自主活动、睾丸和精囊腺指数、Hb、WBC、LY、MO、PLT,降低UR;正丁醇提取物能提高小鼠抓力、游泳时间、自主活动次数、睾丸和精囊腺指数、RBC、Hb、WBC、LY、MO、PLT,降低UR;乙酸乙酯提取物能提高小鼠肛温、抓力、精囊腺指数、Hb、PLT,降低Cr、UR。结论:杜仲的药理作用可作为改善肾阳虚证之腰膝酸软、性欲减退、畏寒肢冷、精神萎靡、阳虚水泛,以及肾精亏虚、肝气虚弱所致血液亏虚的基础;并作为其“甘,温,入肝、肾经药”药性现代科学内涵的组成部分。杜仲水提取物和正丁醇提取物的作用较为接近且较强。
【关键词】 小 鼠 肾阳虚 杜 仲 提取物 性 味 归 经
中国《药典》2005年版记载,杜仲味甘,性温,归肝、肾经,功能补肝肾、强筋骨、安胎,用于肾虚腰痛、筋骨无力、胎动不安等。《神农本草经》谓杜仲“主腰脊痛,补中益精气,坚筋骨,强志……久服轻身不老”。杜仲可用于治疗各种肾阳不足所致之证。为探讨其性、味、归经的现代科学内涵,开展如下研究。
1 实验材料
1.1 药 物 盐杜仲,批号080110,购自浙江中医药大学中药饮片厂,经鉴定为杜仲科植物杜仲Eucommiaulmoides Oliv.树皮的炮制品。药材先制成水提取物;再取药材用10倍体积95%乙醇提取2次,分别制成乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物。水、正丁醇、乙酸乙酯提取物分别加吐温?80稀释至0.125g生药/mL。
1.2 试 剂 肌酐、尿素试剂盒(Cr、UR,上海复兴长征医学科学有限公司,批号P071254、P080431)。血液分析试剂(美国A Drew Scientific Group Co.,批号5018)。苯甲酸雌二醇(上海通用药业股份有限公司,批号070902)。桂附地黄丸(兰州太宝制药有限公司批号,80080542)。
1.3 动 物 ICR小鼠,雄性,体重18~22g,由浙江省实验动物中心提供,合格证号:SCXK(浙)2003?0001。
1.4 仪 器 HEMAVET950动物血液分析仪(美国A Drew Scientific Group Co.);X?Z4型5光道小鼠自发活动自动记录仪、YSL?13A大小鼠抓力测定仪(山东省医学科学院设备供应维修站);威图SELECTRA?E全自动生化仪(荷兰威图公司);DT?ITB电子体温计(上海华辰医用仪表有限公司);LP123电子天平(江苏省常熟市衡器厂)。
2 实验方法
2.1 造模与给药 健康ICR雄性小鼠72只,随机分为对照组,模型组,桂附地黄丸组,杜仲水提取物组、正丁醇提取物组、乙酸乙酯提取物组,共6组,每组12只。除对照组外,其余5组按0.1mL/10g体重腹腔注射0.4mg/mL的苯甲酸雌二醇大豆油稀释液,1天1次,连续15天,造成肾阳虚模型[1]。杜仲提取物各组给予相应的0.125g生药/mL提取物,桂附组给予0.15g生药/mL桂附地黄丸混悬液,对照组和模型组给予0.4%吐温?80,0.1mL/10g灌胃给药,1天1次,连续15天。
2.2 指标检测 观察小鼠一般体征。于给药前3天和给药第12天测量肛温。给药前3天和给药第13天测定游泳时间,超过1小时的以1小时计。给药前2天和给药第14天测定抓力,每只小鼠连续测定2次,取平均值。给药前1天和给药第15~16天,记录10min小鼠自主活动次数。末次给药后,摘眼球取血,一份不加抗凝剂,取血清,依说明书测定血清Cr、UR;另一份加枸橼酸钠抗凝,取血后4小时内测血液学指标:红细胞数量(RBC)、血红蛋白浓度(Hb)、平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、血小板数量(PLT)、白细胞数量(WBC)、嗜中性粒细胞数量(NE)、淋巴细胞数量(LY)、单核细胞数量(MO)、嗜酸性粒细胞数量(EO)、嗜碱性粒细胞数量(BA)。处死小鼠,摘取睾丸、精囊腺,计算指数(%)=脏器重量/体重×100%。
2.3 统计分析 数据以(±s)表示,组间比较采用t?test检验。
3 实验结果
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(责任编辑:李炬)
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